| 今天 ，Biotechniques网站介绍了2014年在该网站发表的5篇有趣和有用的PCR方法相关文章 。
PCR是现代分子生物学中的一种基本技术 ，所以它的任何创新或改进都受到研究人员的极大欢迎。BioTechniques的编辑们一直都非常喜欢PCR方法，尊龙凯时人生就是搏z6com很高兴看到，2014年带来了新技术的强大选择 。在这里 ，尊龙凯时人生就是搏z6com介绍了在过去一年中发表的5篇PCR方法相关论文 ，范围很广 ，从基本老式PCR反应有效性和特异性的改进 ，到尖端技术如数字PCR 。
1 、 一种强大的耐热DNA聚合酶链置换活性可显著改善DNA扩增结果
谁不喜欢一种多功能的工具呢？当你可以用有些奇怪但很方便、孩子喜欢的叉勺时 ，为什么还去用勺子和叉子呢 ？在8月刊的BioTechniques，Ignatov等人描述了DNA聚合酶的叉勺等价物，一种可用于常规PCR反应以及等温扩增的DNA聚合酶。直到现在 ，这两种扩增方法还需要非常不同类型的DNA聚合酶 ：对于PCR来说，一种耐热DNA聚合酶（如Taq酶），可以经受住每一个PCR循环中的热变性步骤 ；对于等温扩增来说 ，一种DNA聚合酶如Bst ，具有很强的链置换活性 ，使DNA链分开而代替热变性。Ignatov和同事们证明 ，一种新型Taq DNA聚合酶突变体 ，具有很强的链置换活性 ，称为SD DNA聚合酶，不仅可用于PCR和环介导等温扩增法（LAMP）以及近描述的聚合酶链置换反应方法 ，而且能够改善灵敏度和效率 ，即使在困难的情况下 ，例如长片段PCR或GC富集模板的扩增 。这种多用途的新型DNA聚合酶应该是对DNA扩增酶工具箱的一种受欢迎的补充。
2 、 牛凝血酶可提高聚合酶链式反应的效率和特异性
当PCR不能正常工作 ，或产生非特异性扩增产物和引物二聚体而不是预期的扩增子时 ，这是非常令人沮丧的。多年来，研究人员已经在PCR反应中添加了许多化合物，以提高DNA扩增的特异性和效率 。这些添加物范围很广 ，从小的有机分子（例如甘油和甜菜碱）到非离子型洗涤剂（如Triton X-100和Tween，到蛋白质如BSA） 。不幸的是，每一种添加物只在一组特定的条件下改善PCR扩增结果 。真正理想的状态是，一种PCR增强剂在尽可能多的不同情况下都可以起作用 ，Xi |
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